作者：王一栋1王双双1郑永克2

单位：

1、医院老年医学科

2、温州医院骨科

摘要：目的探讨细胞因子在肌少症发病机制中的作用。方法本研究例受试者中肌少症患者48例，对照组72例，分别检测外周血血肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、白细胞介素-2受体(IL-2receptor，IL-2R)、IL-6、IL-8、IL-10浓度。结果外周血TNF-α肌少症组为26.3(16.9，35.7)ng/L，对照组为7.3(4.5，10.1)ng/L;IL-1β为13.3(7.8，18.8)ng/L，对照组为3.4(2.3，4.5)ng/L,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。外周血IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10肌少症组分别为.3(.2，.4)U/mL、1.3(0.8，1.8)ng/L、27.9(20.8,35.0)ng/L、29.6(20.9，38.3)ng/L，而对照组分别为.4(.2，.6)U/mL、1.4(1.0，1.8)ng/L、26.5(20.2，32.8)ng/L、27.9(18.5，37.3)ng/L，两组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。结论肌少症组患者外周血TNF-α、IL-1β均高于对照组，提示肌少症组患者可能存在机体微炎性反应。

关键词：肌少症；细胞因子；肿瘤坏死因子-α；白细胞介素-1β

肌肉减少症(简称肌少症)是一种渐进性和全面的骨骼肌丢失及力量减退的综合征，并可能导致机体残疾、生活质量下降甚至死亡的不良后果。与骨质疏松相比，肌少症近10年来才逐渐受到重视。年，中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会发表了《肌少症共识》，提高了我国医务工作者对肌少症的认识，规范了我国肌少症的临床诊疗工作。肌少症是增龄相关疾病，是环境和遗传因素共同作用的复杂疾病，多种风险因素和机制参与其发生。其机制包括运动减少、神经-肌肉功能减弱、增龄相关激素变化、促炎性反应细胞因子水平增高、肌细胞凋亡、遗传因素、营养因素等。本研究从外周血细胞因子水平初步探讨肌少症的发病机制。对象与方法对象本研究为横断面研究，选取年6月至年2月医院老年医学科就诊的患者例，年龄61~86岁，平均年龄(70.2±6.8)岁。入选标准：肌少症的诊断符合中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会年《肌少症共识》的诊断标准。排除标准：近期有感染(感染时间＜1个月)、炎性反应性疾病、自身免疫疾病、恶性肿瘤、严重的营养不良及严重的器官功能不全(包括心力衰竭，呼吸衰竭，肝、肾功能不全等)的患者。医院医学伦理委员会批准(03122009)，获取所有患者知情同意。方法肌少症诊断标准：根据年中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会发表的《肌少症共识》标准。采用双能X线吸收检测法(dualenergyX-rayabsorptiometry，DXA)检测肌量，以四肢肌量指数(appendicularskeletalmassindex，ASMI)[四肢肌量(kg)/身高2(m2)]为评估指标，判定标准为ASMI：男性＜7.26kg/m2、女性＜5.45kg/m2为肌量减低。采用握力器检测肌力，以优势手握力为评估指标，判定标准是优势手握力：男性＜25kg，女性＜18kg为肌力下降。采用常规步速测试检测步速，以记录日常步速下行走6m所需要的时间计算出步速为评判指标，判定标准是：步速＜0.8m/s为步速下降。当步速和握力二者中，一个或两个下降时，则需要检测肌量，肌量减低者诊断为肌少症;而未达到肌量减少标准，可以排除肌少症。当步速和握力二者均未下降者，也可以排除肌少症。分组：依据年中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会发表的《肌少症共识》诊断标准，将入组患者分为肌少症组和对照组(非肌少症组)，其中肌少症患者48例，对照组患者72例。入组后于清晨7时空腹行外周静脉血血肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、白细胞介素-2受体(IL-2receptor，IL-2R)、IL-6、IL-8、IL-10检测。检测方法：采用SiemensHealthcareDiagnos-ticsProductsLtd.在UntiedKingdom生产的TNF-α测定试剂盒[化学发光法，批间变异系数值(coefficientofvariance,CV)为4.0%~6.5%，批内CV值为2.6%~3.6%]、IL-1β测定试剂盒(化学发光法，批间CV值为4.8%~7.7%，批内CV值为2.8%~4.9%)、IL-2R测定试剂盒(化学发光法，批间CV值为6.1%~8.1%，批内CV值为2.9%~3.7%)、IL-6测定试剂盒(化学发光法，批间CV值为5.1%~7.5%，批内CV值为3.5%~6.2%)、IL-8测定试剂盒(化学发光法，批间CV值为5.2%~7.4%，批内CV值为3.6%~3.8%)、IL-10测定试剂盒(化学发光法，批间CV值为4.2%~9.9%，批内CV值为2.8%~3.4%)。参照IMMULITE分析仪操作手册进行实验前的准备、设置、稀释以及质控程序。血样在完全凝集之后再离心，严格按照测定试剂盒说明书操作。质控样本：至少2个水平质控样本(低、高)。统计学方法采用SPSS24.0统计软件，细胞因子用中位数和四分间距表示，即M(P25，P75)，而其他计量资料用均数±标准差(x±s)表示;细胞因子组间比较采用非参数Mann-WhitneyU检验，而其他组间比较采用非配对样本t检验或χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。结果两组患者临床基线资料比较例入组人群中肌少症患者为48例(占40%)，对照组患者为72例(占60%)。两组患者的临床资料如年龄、性别、体质量指数、吸烟、高血压、糖尿病等差异均无统计学意义(P＞0.05)(表1)。两组患者实验室检测指标比较肌少症组患者外周血TNF-α、IL-1β较对照组高，差异有统计学意义(P＜0.05)。而IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10，两组差异无统计学意义(P＞0.05)(表2)。讨论肌少症是增龄相关性疾病，随着人口老龄化，肌少症的发病率将日趋增加。而肌少症的发病机制尚不明确，故目前尚无治疗肌少症的特效药。目前认为，多种风险因素和机制可能参与肌少症的发生、发展，其中促炎因子升高可能与肌少症有关。细胞因子是一类由免疫细胞(淋巴细胞、单核巨噬细胞等)和相关细胞(成纤维细胞、内皮细胞等)产生的调节细胞功能的高活性多功能低分子蛋白质。按功能分为4类：(1)具有抗病毒活性的细胞因子，主要包括干扰素(interferon，IFN);(2)具有免疫调节功能活性的细胞因子，包括IL-2、4、5、7、9、10、12等;(3)具有炎性介导活性的细胞因子，包括TNF、IL-1、6、8等;(4)具有造血生长活性的细胞因子，包括IL-3、集落刺激因子和促红细胞生成素。目前研究显示，免疫系统在肌少症的发生、发展中扮演重要的角色，全身炎性反应导致肌肉组织合成代谢失衡，蛋白分解代谢增加。肌少症发病过程中有多种细胞因子参与，国外研究已证实的细胞因子有TNF-α、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10等。而国内鲜见肌少症细胞因子的研究报道。本研究都是60岁以上的老年人，细胞因子在老年人性别上的差异无统计学意义。本研究显示，肌少症组患者的TNF-α浓度显著高于对照组，提示TNF-α在肌少症的发病过程中可能起重要作用。TNF-α主要来源于巨噬细胞和T淋巴细胞，能促进中性粒细胞黏附而增强细胞外弹性蛋白溶解的活性，还可诱导血管内皮细胞表达黏附因子，通过Akt激酶/mTOR基因途径(Akt激酶是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，mTOR基因是表达雷帕霉素靶蛋白的基因)使肌肉分解代谢增加，从而引起肌肉量减少，促进炎性反应的反应。TNF-α也可以通过激活κB激酶抑制剂(inhibitorofκBkinase，IKK)产生胰岛素抵抗，抑制肌肉组织的合成。Patel等研究显示，血中TNF-α、IL-6浓度与患者的握力成负相关。但Bano等的Meta分析显示，肌少症患者的血CRP水平高，而血TNF-α、IL-6浓度无统计学意义。IL-1由多种细胞分泌，但主要来源于巨噬细胞，作用于中枢神经系统、内皮细胞、肝脏、胸腺细胞、巨噬细胞，能活化免疫细胞，产生细胞因子。VanGammeren等研究显示，IL-1β通过抑制生长激素和胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactorI，IGF-I)的表达和活性诱导肌肉萎缩。IL-1β和TNF-α能降低骨骼肌局部IGF-I的浓度，而在TNF中和抗体和IL-1受体拮抗剂预处理后的小鼠研究中，IL-1β和TNF-α不能减少预处理小鼠骨骼肌IGF-I的浓度。本研究结果显示，肌少症组患者的IL-1β浓度显著高于对照组，提示肌少症患者体内存在较高浓度的IL-1β，可能参与肌肉组织的损伤、凋亡。IL-2主要由TH1细胞分泌，具有多种免疫增强活性，能促进NK细胞增生，并促进B细胞增生及分泌抗体，IL-2在免疫应答中起关键作用，衰老和很多疾病可使IL-2下降而影响整个免疫系统。本研究结果显示，肌少症组患者的IL-2浓度未见明显差异。IL-6由单核细胞、内皮细胞等多种细胞产生，具有多种生物学效应，在炎性反应、宿主防御和组织损伤中有广泛的体液和细胞免疫作用。目前，IL-6被认为是“myokine”，在非感染的状态下，主要来源于肌细胞，IL-6能促进肌组织代谢、脂肪酸氧化和葡萄糖摄入。IL-6可能通过泛素蛋白和信使核糖核酸(messengerribonucleicacid，mRNA)、E3连接酶蛋白和mRNA途径降解肌细胞。Cesari等研究显示，IL-6浓度的升高能预示着机体失能和高的病死率。但是本研究显示，肌少症组患者的IL-6浓度与对照组对比，未见明显差异。IL-8是体内最主要的内源性趋化因子，其主要作用通过趋化、激活中性粒细胞而实现，它可诱导中性粒细胞形态改变，使细胞内Ca2+浓度一过性升高，促进其脱颗粒，溶酶体酶释放，生物活性脂质形成和呼吸爆发，还可提高中性粒细胞在炎性反应部位的结合能力。本研究显示，两组患者的IL-8浓度未见明显差异。IL-10是一种抗炎细胞因子，来源于Th2等细胞，作用于巨噬细胞，下调细胞MHCⅡ的表达，减弱抗原提呈，具有减轻炎性反应反应作用。本研究显示，两组患者的IL-10浓度未见明显差异。总之，本研究显示，肌少症组患者的外周血TNF-α、IL-1β较对照组显著升高，提示肌少症患者机体内可能存在微炎性反应状态，从而直接或间接引起肌组织的丢失。预览时标签不可点